应用方案
磷脂酰胆碱的高效液相色谱HPLC检测方案
发布时间:2017-01-19   
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[磷脂酰胆碱]


磷脂酰胆碱是一种两性分子,由亲水的头部和疏水的尾部组成。亦称卵磷脂。磷脂酰胆碱是磷脂的主要成分之一,从植物中提取的,磷脂酰胆碱将大脑的指令迅速传递,信息传递速度越快,记忆力越强,是健脑食物。它能增强婴儿智力,提高学习效率。尤其是胎儿,在生长发育中对磷脂酰胆碱的需求极大。


以下是赛智科技利用LC-10Tvp高效液相色谱仪对磷脂酰胆碱进行的HPLC检测方案。


1、仪器与试剂


1.1仪器、设备


LC-10Tvp高效液相色谱仪

Sepax HP-Silica 色谱柱:250mm×4.6mm×5μm 

分析天平

恒温箱,温度控制在100±1℃

微量进样器,(100μL)一支

漩涡混匀器

针头过滤器

微孔滤膜:0.45µm


1.2试剂

甲醇:色谱纯。

异丙醇:色谱纯。

正己烷,色谱纯。

冰醋酸:分析纯。

三乙胺:分析纯

去离子水

磷脂酰胆碱标准液


2、供试品溶液和对照品溶液的制备


对照品储备液的制备:   精密称取磷脂酰胆碱标准品0.05g(精确至0.0001g),置于50ml容量瓶中,加甲醇与三氯甲烷的混合溶液溶解并稀释至刻度,配成1mg/mL的磷脂酰胆碱标准储备液,置-6℃下冷藏。


标准曲线系列浓度配置:朱雀吸取上述储备液各1mL、2mL、4mL、8mL,分别置于10mL容量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,配成浓度分别为0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.4mg/mL及0.8mg/mL的磷脂酰胆碱溶液,用0.45um微孔滤膜过滤,待用。


供试品溶液的制备:   根据样品中磷脂酰胆碱的含量,准确称取试样10mg~50mg,用流动相溶解,超声处理15min,并用流动相稀释至10ml。


3、色谱条件


Silica色谱柱:4. 6 mmx250 mm,粒度5 µm

流动相:

流动相A:甲醇:水:冰醋酸:三乙胺 = 85:15:0.45:0.05

流动相B:正己烷:异丙醇:A = 10: 40: 50

波长:205nm

流速:1. 0 mL/min

柱温:40℃


4、测定法


分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20ul,注入液相色谱仪,测定,即得


5、谱图


标准品谱图


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样品谱图


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仪器配置


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