应用方案
赛智科技推出【荷叶黄酮类化合物】的高效液相色谱检测方案
发布时间:2014-04-23   
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【荷叶】

荷叶系属睡莲科属植物,生在水、池塘或湖泊中,在我国南北方均有栽培,《本草纲目》记载:"荷叶服之,令人瘦劣,单服可以消阳水浮之气"。荷叶除了含有普通植物所共有的碳水化合物、脂类、蛋白质、单宁等常规化学成分外,还含有具有明显生物活性和生理功能的黄酮化合物和生物碱这两大类物质。 现代医学研究表明, 荷叶黄酮具有抗氧化、抗衰老、清热、降血脂、降胆固醇及治疗心脑血管疾病等药用保健功能。1991年11月中华人民共和国卫生部将荷叶列入第二批药食两用名单之中。


【荷叶黄酮】

英文名称:lotus flavonoids

拉丁名: Nelumbo nuciferea Gaertn.

使用部位: 叶

植物来源: 本品来源于睡莲科植物莲(Nelumbo nucifera Gaertn)的干燥叶。夏、秋二季采收,晒成七八成干时,除去叶柄,折成半圆形或折扇性,干燥

外观: 棕色或棕黄色粉末

有效成分: 荷叶黄酮


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荷叶中的黄酮类化合物主要有荷叶苷,其次是次是槲皮素、异槲皮素等常见的黄酮类物质。Awatif等从荷叶中分离出nympholide A,nympholide B和myricetin-3"-(6"p-coumaroyl)glucoside(见图1、图2、图3)三种黄酮类物质。我国荷叶资源十分丰富,从荷叶中提取的黄酮类物质安全,无毒无害。荷叶黄酮类物质经试验表明,有明显的体外抗氧化作用,是能够清除链引发阶段的自由基,或(和)直接捕获自由基反应链中的自由基的,能够起到预防和断链双重作用的。



对于荷叶中黄酮类化合物,赛智科技采用高效液相色谱法,准确测定黄酮类化合物含量,下面以槲皮素为例。


    以下是赛智科技利用LC-10Tvp高效液相色谱仪对荷叶中槲皮素进行的HPLC检测方案

    (本应用方案请勿转载,侵权必究)


1、仪器与试剂

    1.1仪器、设备

    LC-10Tvp高效液相色谱仪

    Vertex 色谱柱:250mm×4.6mm×5μm

    分析天平

    水浴回流装置

    针头过滤器

    微孔滤膜:0.45µm

    1.2试剂

    甲醇(HPLC)

    乙腈(HPLC)

    磷酸(AR)

    盐酸(AR)


2、供试品溶液和对照品溶液的制备

 对照品溶液的制备   取槲皮素对照品适量,精密称定,加甲醇制成合适浓度的溶液,即得。

 供试品溶液的制备 取干燥荷叶适量,研成细粉。取本品粉末(过6号筛)约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入醇100ml,水浴回流90min,回收甲醇,残渣精密加入甲醇-5%盐酸(4:1)的混合液10ml,准确称定质量,水浴回流30min,放冷,再称定质量,用甲醇补足减失的量,摇匀,过滤,取续滤液,过0.45um滤膜,即得。


3、色谱条件

色谱柱:C18, 4. 6 mmx250 mm,粒度5 µm

流动相:以乙腈-0.4%磷酸=35:65

波长:360nm

柱温:25℃

流速:1. 0 mL/min


4、测定法

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10ul,注入液相色谱仪,测定,即得


5、谱图